Описание
Набор EZ DNA Methylation Kit предназначен для простой процедуры бисульфитной конверсии ДНК.
Процедура основана на трех этапах реакции, происходящей между цитозином и бисульфитом натрия, в результате которой цитозин превращается в урацил. Реакция десульфонирования проводится в спин-колонках, что удобно и не требует лишних громоздких этапов преципитации. Набор разработан для предотвращения деградации матрицы, снижения потерь ДНК в результате обработки и очистки, обеспечивая при этом полную конверсию ДНК. Очищенная конвертированная ДНК предназначена для ПЦР или последующих анализов статуса метилирования ДНК (рестрикции, секвенирования и т.п.). Этот набор одобрен компанией Illumina для пробоподготовки перед методиками GoldenGate и Infinum.
Конверсия неметилированного цитозина. ПЦР-продукт размером 459 п.о. амплифицировали с конвертированной ДНК (трек 1, EZ DNA Methylation Kit) и интактной ДНК (трек 2) и обрабатывали EcoRI. Цитозин в сайте EcoRI конвертировался в урацил и не позволил эндонуклеазе разрезать фрагмент.
