Описание
SARS-CoV-2 recombinant proteins / SARS-CoV-2 рекомбинантные белки
Оценка количества антител в плазме крови дополняет РНК-тесты и улучшает понимание течения заболевания. Разработаны тесты, выявляющие антитела к белку нуклеокапсида вируса (N) и/или к спайк-белку (S), на основе иммуноферментного анализа (ИФА), иммунофлуоресценции, иммунохроматографического анализа.
Нейтрализующие антитела, нацеленные на спайк-белки (S) и нуклеокапсид (N) нового коронавируса SARS-CoV-2, образуются уже на 9-й день после инфицирования. Показано, что у людей с ослабленным иммунитетом антитела на оба белка появлялись в детектируемых количествах позже.
RPN-SARSCOV2-60-214aa AURON ARTscience
SARS-CoV-2 (2019-nCoV) 60-214aa fragment of Nucleocapsid Protein, E.coli Recombinant, fused to His tag at N-terminal
The N protein is a 423 amino acid, predicted phospho-protein of 46 kDa, which shares little homology with other members of the Coronavirus genus (Timani et al., 2004; Surjit et al., 2004). Several studies have found that N protein is highly immunogenic, thus antibody response in patients with SARS is directed most frequently and predominantly to the nucleocapsid. It has also been found that anti N antibodies are detected early and with high specificity during infection (Leung et al., 2004). Usage of 60-214aa fragment of Nucleocapsid Protein in ELISE provides more specific signal (Chen et al.2004, Wang et al., 2012).
Protein N 60-214aa sequence:
MGSSHHHHHHSSGLVPRGSHMGKEDLKFPRGQGVPINTNSSPDDQIGYYRRATRRIRGGDGKMKDLSPRWYFYYLGTGPEAGLPYGANKDGIIWVATEGALNTPKDHIGTRNPANNAAIVLQLPQGTTLPKGFYAEGSRGGSQASSRSSSRSRNSSRNSTPGSSRGTSPARMAGNG
Regulatory status: RUO (Research Use Only)
Type: Recombinant protein
Source: E. coli
Purity: Greater than 95.0% as determined by HPLC
Form: Dry (lyophilized)
Size: 0.1 mg, 0.5 mg, 1 mg
REFERENCES:
Chen Z, et al. Antigenicity analysis of different regions of the severe acute respiratory syndrome coronavirus nucleocapsid protein. Clin Chem. 2004. PMID: 15054081
Hui-Juan Wang, Wei-Min Zhou, Lin-Ling Zhang, Li Ruan, Ning-Shao Xia, Wen-Jie Tan Antigenicity Characterization of Six Different Fragments of SARS-CoV N Protein Expressed in E. Coli. Zhonghua Shi Yan He Lin Chuang Bing Du Xue Za Zhi 2012 Feb;26(1):40-2.
Leung DT, Tam FC, Ma CH, Chan PK, Cheung JL, Niu H, Tam JS, Lim PL: Antibody response of patients with severe acute respiratory syndrome (SARS) targets the viral nucleocapsid. J Infect Dis. 2004, 190: 379-386. 10.1086/422040.
Surjit M, Liu B, Kumar P, Chow VT, Lal SK: The nucleocapsid protein of the SARS coronavirus is capable of self-association through a C-terminal 209 amino acid interaction domain. Biochem Biophys Res Commun. 2004, 317: 1030-1036. 10.1016/j.bbrc.2004.03.154.
Timani KA, Ye L, Ye L, Zhu Y, Wu Z, Gong Z: Cloning, sequencing, expression, and purification of SARS-associated coronavirus nucleocapsid protein for serodiagnosis of SARS. J Clin Virol. 2004, 30: 309-312. 10.1016/j.jcv.2004.01.001.
SARS-CoV-2 (2019-nCoV) 60-214aa фрагмент белка нуклеокапсида (N), рекомбинант E.coli, с присоединенной His-меткой на N-конце.
N-белок представляет собой предсказанный фосфо-белок массой 46 кДа, состоящий из 423 аминокислот, который имеет небольшую гомологию с другими представителями рода Coronavirus (Timani et al., 2004; Surjit et al., 2004). Несколько исследований показали, что белок N является высокоиммуногенным, поэтому ответ антител у пациентов с ОРВИ направлен наиболее часто и преимущественно на нуклеокапсид. Также было обнаружено, что анти-N-антитела обнаруживаются на ранней стадии и имеют высокую специфичность во время инфекции (Leung et al., 2004). Использование 60-214аа фрагмента белка нуклеокапсида в ELISE обеспечивает более специфический сигнал (Chen et al.2004, Wang et al., 2012).
Нормативный статус: RUO (Research Use Only — только для научных исследований, не для медицины)
Тип: рекомбинантный белок
Источник: E.coli
Чистота: более 95,0% по данным ВЭЖХ
Хранение и транспортировка: при температуре не выше 10°С
Фасовка: 0,1 мг, 0,5 мг, 1 мг (сухая субстанция, лиофилизированная)
АНАЛИТИЧЕСКИЙ ПАСПОРТ
Рекомбинантного белка RPN—SARSCOV2-60-214aa
AURON ARTscience
Аминокислотная последовательность:
MGSSHHHHHHSSGLVPRGSHMgkedlkfprgqgvpintnsspddqigyyrratrrirggdgkmkdlsprwyfyylgtgpeaglpygankdgiiwvategalntpkdhigtrnpannaaivlqlpqgttlpkgfyaegsrggsqassrsssrsrnssrnstpgssrgtsparmagng
| Наименование продукта: | Рекомбинантный белок RPN—SARSCOV2-60-214aa |
| Способ получения: | Прокариотическая экспрессия гена |
| Условное обозначение: | RPN—SARSCOV2-60-214aa |
| Категория продукта: | реактив |
| Молекулярная масса, Да | 18828.61 |
| Количество продукта | 30 мг |
| Внешний вид: | Сухая субстанция (лиофилизированная) |
| Условия хранения: | Хранить при температуре не выше 10°С |
Хроматографический анализ рекомбинантного белка RPN—SARSCOV2-60-214aa проводили на колонке VDSpher PUR 100 C18-E 250×4,6 mm в градиенте концентрации 80% AcCN в 0,1% ТФУ от 30 до 70% со скоростью 1 мл/мин.
Электрофоретический анализ RPN-SARSCOV2-60-214aa в 15% ПААГ в денатурирующих условиях.
РЕЗУЛЬТАТЫ АНАЛИЗОВ
| Наименование анализа | Метод | Требования | Результаты | Соответствие |
| Хроматографичес-кая чистота | ОФ-ВЭЖХ | >95% | 95,1% | Соответствует |
| Молекулярная масса, Да | Белковый электрофорез | 18828.61 | 18828.61 | Соответствует |
